Adenovirus tipo 1 per Equini con controllo interno Real Time PCR Detection Kit

REF: GZE011| SKU: 317360| BRAND: GZ MED

Descrizione Scientifica

Il kit GZ MED Adenovirus tipo 1 per Equini con controllo interno Real Time PCR costituisce un’architettura diagnostica avanzata basata sulla biologia molecolare per l’identificazione qualitativa e il supporto alla rilevazione del genoma dell’Adenovirus equino di tipo 1 (EAdV-1), agente infettivo associato a problematiche dell’apparato respiratorio e a patologie sistemiche nei puledri e nei soggetti immunocompromessi. Sfruttando la tecnologia della PCR Real Time accoppiata a sonde fluorogeniche a idrolisi, il test fornisce un’elevata sensibilità analitica per l’identificazione precoce degli acidi nucleici virali.

Questo saggio qualitativo ad uso professionale rappresenta un affidabile ausilio diagnostico destinato esclusivamente a Medici Veterinari, Ambulatori Veterinari e Cliniche Veterinarie. L’integrazione di un controllo interno endogeno consente di validare l’intero processo analitico, garantendo la corretta esecuzione delle fasi di campionamento, estrazione degli acidi nucleici e amplificazione PCR. Il formato in comodi monotest pronti all’uso minimizza i tempi di manipolazione e i rischi di contaminazione crociata, consentendo un flusso di lavoro efficiente, rapido e standardizzato sul sistema PCR VET di Gangzhu Medical.

Protocollo d’Esecuzione

• Preparazione Campione:• Campioni liquidi (Sangue intero EDTA, urina, versamenti o liquidi biologici): Introdurre 200 µL di campione liquido direttamente nella provetta contenente il buffer di conservazione per procedere all’omogeneizzazione. Nel caso di urina, trasferire i 200 µL di campione direttamente nel pozzetto di lisi “LB” della cartuccia.• Campioni su tampone (tamponi oculari, nasofaringei, rettali o fecali): Raccogliere accuratamente il campione mediante il tampone monouso fornito. Inserire il tampone nella provetta contenente la soluzione diluente di conservazione, agitare vigorosamente per facilitare il rilascio dei patogeni, quindi spezzare l’asta nell’apposito punto di frattura prima di richiudere il tubo.
• Estrazione Nucleica Automatizzata: Estrarre le cartucce di estrazione monouso necessarie per la sessione analitica e rimuovere delicatamente la pellicola sigillante in alluminio. Trasferire esattamente 200 µL del campione biologico preparato o della sospensione all’interno del pozzetto di lisi contrassegnato con la sigla “LB”.
• Automazione del Processo: Posizionare il puntale conduttivo per estrazione (magnetic rod sleeve) nell’alloggiamento designato contrassegnato dal simbolo “O”, posto a sinistra del pozzetto “LB”. Inserire la cartuccia nell’estrattore automatizzato PCR VET e avviare il protocollo preimpostato premendo il tasto “Run”. Il processo robotizzato di purificazione a sfere magnetiche si completerà autonomamente in circa 8 minuti, segnalato da un avviso acustico.
• Preparazione della Reazione PCR: Prelevare con cura 20 µL di acido nucleico purificato ed eluito dal pozzetto finale “EB” utilizzando una micropipetta idonea e puntali sterili con filtro. Trasferire il volume estratto direttamente nella provetta eppendorf contenente il mix di amplificazione liofilizzato. In caso di impiego del controllo positivo, ricostituire il relativo liofilizzato aggiungendo 100 µL di acqua purificata o Elution Buffer sterile e trasferirne 20 µL nel tubo PCR corrispondente.
• Dissoluzione e Avvio Ciclo Termico: Ricostituire completamente la master-mix liofilizzata picchiettando delicatamente il fondo della provetta con le dita per garantire l’omogeneità dei reagenti. Assicurarsi, mediante una breve centrifugazione di 10 secondi o un deciso movimento discendente, che tutto il volume risieda stabilmente sul fondo del tubo e che non vi siano bolle d’aria residue, potenziali fonti di interferenza fluorimetrica. Inserire le provette nel termociclatore Real Time PCR VET, configurare i canali di lettura software e avviare il profilo termico.
• Interpretazione Risultati: Il software esegue l’analisi discriminando le curve di amplificazione ed i valori di Cycle Threshold (Ct):• Risultato Positivo: Comparsa di una cinetica di amplificazione a forma di “S” accoppiata a un valore di Ct < 36 nel canale specifico del target.• Risultato Negativo: Assenza di curva di amplificazione o valore Ct uguale a 0 oppure ≥ 36. Un esito negativo non esclude totalmente la presenza dell’infezione ma ne riduce fortemente la probabilità; il dato deve essere sempre contestualizzato dal Medico Veterinario.

Tabella delle Performance

Il parere tecnico: Questo saggio molecolare rappresenta uno standard d’eccellenza per l’identificazione precoce ed estremamente selettiva dell’Adenovirus equino di tipo 1. L’adozione di una master-mix liofilizzata pre-dosata protegge l’integrità del saggio da fluttuazioni termiche accidentali ed evita errori di pipettamento manuale in clinica. L’integrazione del flusso di lavoro con la piattaforma estrattiva PCR VET riduce i tempi operativi totali a circa un’ora, consentendo decisioni cliniche e gestionali tempestive in scuderia o allevamento. I risultati del test forniscono un supporto alla rilevazione e devono essere sempre valutati dal Medico Veterinario in base al quadro clinico e all’anamnesi.

Team Tecnico BIOLAB Diagnostici – divisione Veterinaria

Biolab è distributore esclusivo Italia di GZ MED