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GZ MED Equine Arteritis Virus (EAV) per Equini con controllo interno Real Time PCR – Kit 8 MonoTest
Soluzione diagnostica molecolare avanzata in Real Time PCR per l’identificazione qualitativa e il supporto alla rilevazione dell’RNA dell’Arterite Virale Equina (EAV). Sviluppato per l’integrazione nativa con il sistema ad automazione PCR VET di Gangzhu Medical, questo kit standardizza i processi analitici in ambito clinico e di scuderia, offrendo riscontri oggettivi in tempi rapidi con una minima interazione manuale.
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🎯 Specie Target: Test diagnostico altamente selettivo ottimizzato per Equini.
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🧪 Matrice Campione: Flessibilità analitica superiore: idoneo per sangue intero in EDTA (200 µL), tamponi nasofaringei, sperma o omogenati di tessuto (linfonodo/polmone).
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⏱ Durata Workflow: Estrazione guidata a biglie magnetiche in soli 8 minuti; reazione PCR complessiva conclusa in circa 1 ora.
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📊 Affidabilità e Controllo: Sistema Multiplex con controllo interno (canale HEX) per monitorare l’efficienza di campionamento ed estrazione; sensibilità analitica (LOD) calibrata a 1000 copie/ml.
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📦 Configurazione Monodose: Kit da 8 monotest indipendenti provvisti di cartucce pre-riempite, puntali magnetici dedicati e master-mix PCR liofilizzata.
Equine Arteritis Virus (EAV) Real Time PCR Detection Kit
REF: GZE002| SKU: 317257|BRAND: GZ MED
Equini
Sangue EDTA, tamponi, tessuti
~ 1 Ora
8 Monotest completi
Descrizione Scientifica
Il kit Equine Arteritis Virus (EAV) Real Time PCR è un sistema diagnostico molecolare avanzato per l’identificazione qualitativa dell’RNA del virus dell’Arterite Equina negli equidi, l’agente eziologico responsabile di sindromi respiratorie, aborto e infezioni persistenti nello stallone. Sfruttando la tecnologia PCR Real Time basata su sonde ad idrolisi ad alta specificità, il kit offre un supporto alla rilevazione diretta e precoce del target virale da diverse matrici biologiche. Il sistema integra primer e sonde specifici per regioni conservate progettati come controllo interno, al fine di monitorare la corretta raccolta del campione, l’estrazione degli acidi nucleici e l’amplificazione PCR. Questo esame molecolare per uso professionale rappresenta un efficiente ausilio diagnostico B2B per lo screening rapido e le indagini epidemiologiche in allevamenti e cliniche veterinarie.
Protocollo d’Esecuzione
- Preparazione Campione: Per campioni ematici, prelevare 200 µL di sangue intero EDTA e addizionarli al buffer di preservazione. Per tamponi nasofaringei o seminali, risciacquare accuratamente il tampone nel buffer di preservazione. Per i tessuti (es. polmone o linfonodi) preparare un omogenato al 10% in soluzione tampone prima dell’estrazione. Miscelare accuratamente.
- Estrazione Nucleica: Estrarre i kit dei reagenti di estrazione monouso pre-riempiti secondo necessità e rimuovere la pellicola protettiva superiore. Trasferire 200 µL della soluzione preparata nel pozzetto di caricamento contrassegnato con la sigla “LB”. Aggiungere nello stesso pozzetto “LB” 20 µL di sospensione di biglie magnetiche e 20 µL di Proteinasi K.
- Automazione del Processo: Posizionare il puntale magnetico nella prima posizione della cartuccia di estrazione a sinistra del pozzetto “LB”. Inserire il kit nell’estrattore automatizzato della linea Gangzhu Medical, verificando il corretto posizionamento sul fondo del supporto (il LED diventerà rosso). Avviare il ciclo di estrazione automatica premendo il tasto “Run”. La procedura automatizzata si completa in circa 8 minuti ed è segnalata da un avviso acustico.
- Allestimento della Reazione PCR: Prelevare accuratamente 20 µL di acido nucleico purificato dal pozzetto di eluizione finale “EB” utilizzando una pipetta sterile con un nuovo puntale e trasferirli direttamente nella provetta PCR contenente il master-mix con reagenti liofilizzati.
- Dissoluzione e Ciclo Termico: Ricostituire e sciogliere interamente il reagente liofilizzato picchiettando leggermente il tubo con le dita. Assicurarsi, tramite una leggera agitazione o breve centrifugazione, che tutto il volume di reazione risieda sul fondo e che non vi siano bolle d’aria visibili, al fine di prevenire forti interferenze del segnale fluorimetrico. Posizionare le provette nei pozzetti dello strumento Real-Time PCR e avviare il ciclo termico impostando il programma dedicato. I canali di lettura della fluorescenza sono FAM (per il target Equine Arteritis Virus) e HEX (per il controllo interno).
- Interpretazione Risultati: L’analisi viene eseguita dall’interfaccia dello strumento basandosi sulle curve e sui valori di Ct. Il campione è considerato positivo in presenza di una tipica curva di amplificazione nel canale FAM con Ct < 36. Valori di Ct compresi tra 36 e 40 indicano un risultato borderline e richiedono la ripetizione del test per conferma.
Tabella delle Performance
| Sensibilità (LOD) | 1000 copie/ml |
| Riproducibilità (CV) | < 5% (Coefficiente di variazione sui valori Ct su replicati ripetuti 10 volte) |
| Specificità d’Infezione | Elevata specificità per Equine Arteritis Virus. Assenza di cross-reattività con matrici o patogeni correlati quali Theileria equi, Equine Herpesvirus 1, Equine Herpesvirus 4, Anaplasma phagocytophilum e Streptococcus equi. |
| Conservazione e Stabilità | Stoccaggio tra 4 – 30 °C | Validità del kit: 18 mesi |
Il parere tecnico: L’implementazione clinica di questo test molecolare Point-of-Care permette di superare i limiti temporali e operativi dei tradizionali metodi colturali o sierologici per l’Arterite Virale Equina. L’utilizzo di una master mix liofilizzata pre-dosata salvaguarda i reagenti critici dallo shock termico e minimizza l’errore dell’operatore in fase di microscatto. L’integrazione del flusso con il sistema PCR VET garantisce risultati oggettivi standardizzati, essenziali per supportare un intervento tempestivo o il monitoraggio riproduttivo in scuderia. I risultati del test vanno sempre valutati dal Medico Veterinario in associazione al quadro clinico ed epidemiologico generale.
Team Tecnico BIOLAB Diagnostici – divisione Veterinaria
Biolab è distributore esclusivo Italia di GZ MED
