Borrelia burgdorferi Real Time PCR Detection Kit

REF: GZP008| SKU: 317319|BRAND: GZ MED

Descrizione Scientifica

Il kit Borrelia burgdorferi Real Time PCR è un sistema diagnostico molecolare avanzato sviluppato per l’identificazione qualitativa del DNA di Borrelia burgdorferi in campioni biologici di canidi e felini. L’infezione, trasmessa principalmente da zecche vettrici, è l’agente eziologico della Malattia di Lyme. Sfruttando la tecnologia della PCR Real Time basata su sonde ad idrolisi ad elevata specificità e l’efficienza della Taq DNA polimerasi, il kit consente una rilevazione diretta, precoce e sensibile del patogeno. Questo esame rappresenta un valido supporto alla rilevazione clinica e all’indagine epidemiologica sul campo, superando i limiti dei test sierologici tradizionali nelle fasi precoci della malattia. Sviluppato esclusivamente per uso professionale in vitro, il sistema è ottimizzato per operare in combinazione nativa con l’ecosistema PCR VET di Gangzhu Medical.

Protocollo d’Esecuzione

• Preparazione e Raccolta del Campione:

  • Campioni liquidi: Per sangue intero in EDTA, versamento pleurico o ascite, pipettare accuratamente 200 µL di campione all’interno della provetta contenente il reagente di conservazione e agitare bene. Per campioni di urina, inoculare direttamente 200 µL nel pozzetto di lisi “LB” della cartuccia.

  • Campioni da tampone (fecale, anale, oculare, nasale o faringeo): Strofinare accuratamente la zona interessata con il tampone sterile fornito, inserire l’estremità nel buffer di conservazione, spezzare l’asta e agitare per favorire la completa dissoluzione dei patogeni nel liquido.

• Estrazione Nucleica: Estrarre le cartucce monouso pre-riempite necessarie e rimuovere la pellicola protettiva superiore. Trasferire 200 µL del campione preparato nel pozzetto di caricamento contrassegnato come “LB”.
• Automazione del Processo: Posizionare il manicotto protettivo (puntale magnetico) nella guida corrispondente a sinistra del pozzetto “LB”. Inserire la cartuccia nell’estrattore automatizzato rispettando l’orientamento corretto indicato lateralmente. Quando il sensore rileva la cartuccia, il LED del canale si illumina di rosso. Avviare il ciclo premendo il tasto “Run”; il processo guidato di purificazione a biglie magnetiche si completa in circa 8 minuti ed è segnalato da un avviso acustico.
• Allestimento della Reazione PCR: Prelevare con precisione 20 µL di acido nucleico purificato dal pozzetto di eluizione finale “EB” utilizzando un puntale sterile sterile e trasferirli direttamente nella provetta PCR contenente il master-mix con reagenti liofilizzati. Nel caso del controllo positivo liofilizzato, ricostituirlo preventivamente con 100 µL di acqua purificata ed utilizzare 20 µL per la relativa reazione.
• Dissoluzione e Ciclo Termico: Ricostituire completamente la miscela liofilizzata picchiettando delicatamente il fondo della provetta con le dita. Assicurarsi, tramite una leggera agitazione o una breve centrifugazione per 10 secondi, che l’intero volume risieda sul fondo e che non vi siano bolle d’aria per evitare interferenze con i segnali fluorimetrici di fondo. Posizionare le provette nei pozzetti dello strumento Real-Time PCR VET, configurare i dettagli e avviare il programma specifico rilevato tramite la scansione del codice a barre.
• Interpretazione Risultati: Il sistema analizza l’andamento delle curve di amplificazione nel canale FAM. Un campione è considerato Positivo in presenza di una tipica curva ad S con un valore di Ct < 36. Il risultato è considerato Negativo se non si osserva alcuna curva e il valore di Ct = 0 o Ct ≥ 36.

Tabella delle Performance

Il parere tecnico: L’implementazione clinica di questo sistema in Point-of-Care consente di ottimizzare l’iter diagnostico legato al sospetto di Malattia di Lyme nei piccoli animali. La stabilità garantita dai reagenti di amplificazione liofilizzati pre-dosati previene i rischi di degradazione termica accidentale e mitiga l’errore umano correlato al pipettamento manuale. L’integrazione del flusso d’estrazione e amplificazione sul sistema PCR VET fornisce un riscontro oggettivo e altamente riproducibile in circa un’ora, facilitando l’adozione tempestiva di protocolli terapeutici mirati. I risultati del test si configurano come un ausilio diagnostico e devono essere costantemente contestualizzati dal Medico Veterinario in relazione all’anamnesi e al quadro clinico generale dell’animale.

Team Tecnico BIOLAB Diagnostici – divisione Veterinaria

Biolab è distributore esclusivo Italia di GZ MED