Candidatus Mycoplasma turicensis per Felini Real Time PCR Detection Kit

REF: GZP087| SKU: 317304| BRAND: GZ MED

Descrizione Scientifica

Il kit GZ MED Candidatus Mycoplasma turicensis per Felini Real Time PCR costituisce un’architettura molecolare avanzata per la determinazione qualitativa e la rilevazione rapida del DNA di Candidatus Mycoplasma turicensis, micoplasma emotropico di cruciale interesse clinico associato a patologie infettive e stati anemici nei felini. Basato sulla tecnologia della PCR Real Time accoppiata a sonde fluorogeniche a idrolisi, il saggio fornisce un sensibile supporto alla rilevazione degli acidi nucleici batterici direttamente da matrici biologiche ematiche ed eterogenee, superando le notevoli difficoltà di isolamento microbiologico legate alla natura non coltivabile in vitro di questi microrganismi.

Questo test qualitativo per uso professionale si configura come un moderno ausilio diagnostico destinato in via esclusiva a Medici Veterinari, Ambulatori Veterinari e Cliniche Veterinarie. L’impiego della PCR automatizzata Point-of-Care permette di superare i limiti intrinseci dell’esame microscopico diretto su striscio ematico, condizionato da fluttuazioni della batteriemia e artefatti di colorazione, garantendo una discriminazione accurata dello stato infettivo in corso. La strutturazione del kit in comodi monotest pre-allestiti riduce sensibilmente i passaggi manuali di pipettamento, riducendo al minimo il rischio di contaminazione crociata da aerosol e massimizzando l’efficienza dei flussi Point-of-Care in sinergia esclusiva con il sistema estrattivo e termociclatore PCR VET di Gangzhu Medical.

Protocollo d’Esecuzione

• Preparazione Campione:
  
  • Campioni liquidi (Sangue intero in EDTA, versamento pleurico, ascite o altri liquidi): Inoculare 200 µL di campione direttamente all’interno della provetta contenente la soluzione diluente di conservazione, quindi agitare e miscelare con cura per l’omogeneizzazione. Per i campioni di urina, inoculare 200 µL direttamente nel pozzetto di lisi “LB” della cartuccia.
  
  • Campioni su tampone: Raccogliere il materiale tramite il tampone clinico monouso. Inserire il tampone nel buffer di conservazione, agitare vigorosamente per facilitare la completa sospensione e dissoluzione dei patogeni, quindi spezzare l’asta nell’apposito punto di frattura prima di richiudere.
• Estrazione Nucleica Automatizzata: Prelevare le cartucce monouso di estrazione necessarie per la sessione di lavoro e rimuovere delicatamente la pellicola protettiva superiore in alluminio. Trasferire esattamente 200 µL della sospensione o del campione biologico preparato nel pozzetto di lisi contrassegnato dalla sigla “LB” (Lysis Buffer).
• Automazione del Processo: Alloggiare il puntale conduttivo per estrazione (magnetic rod sleeve) nella posizione dedicata contrassegnata dal simbolo “O”, situata immediatamente a sinistra del pozzetto “LB”. Inserire la cartuccia nell’apposito modulo dell’estrattore automatizzato PCR VET e avviare il protocollo preimpostato premendo “Run”. Il ciclo robotizzato a sfere magnetiche si conclude autonomamente in circa 8 minuti ed è notificato da un segnale acustico.
• Preparazione della Reazione PCR: Prelevare con cura 20 µL di acido nucleico purificato ed eluito dal pozzetto finale “EB” utilizzando una micropipetta e un puntale sterile con filtro. Trasferire il volume direttamente nella provetta eppendorf contenente la master-mix con reagenti liofilizzati. In caso di impiego del Controllo Positivo, ricostituire il liofilizzato bianco in cluster aggiungendo 100 µL di acqua purificata o Elution Buffer sterile e trasferirne 20 µL nella provetta PCR corrispondente.
• Dissoluzione e Avvio Ciclo Termico: Ricostituire completamente la master-mix liofilizzata picchiettando delicatamente il fondo della provetta con le dita. Assicurarsi, mediante una breve centrifugazione di 10 secondi o un deciso movimento discendente, che tutto il liquido risieda stabilmente sul fondo e che non vi siano bolle d’aria residue, potenziali fonti di interferenza fluorimetrica o di artefatti analitici. Inserire le provette nel termociclatore Real Time PCR VET, configurare i canali tramite software e avviare il profilo termico.
• Interpretazione Risultati: Il software analitico discrimina la presenza del target combinando i canali di emissione e i valori di Cycle Threshold (Ct):
  
  • Risultato Positivo: Comparsa di una cinetica di amplificazione tipica a forma di “S” accoppiata a un valore di Ct < 36 nel canale specifico del patogeno target.
  
  • Risultato Negativo: Assenza di curva di amplificazione o valore Ct uguale a 0 oppure ≥ 36. Un esito negativo indica l’assenza di livelli rilevabili di DNA del target, da valutare sempre nel contesto clinico complessivo.

Tabella delle Performance

Il parere tecnico: Questo pannello molecolare rappresenta uno strumento diagnostico d’elezione per l’identificazione precoce e accurata di Candidatus Mycoplasma turicensis nei felini. Trattandosi di un microrganismo parassita ematico ad elevato impatto, la specificità e la rapidità garantite dalla PCR a sonda riducono in modo drastico le incertezze diagnostiche collegate alla microscopia tradizionale. La stabilità del master-mix liofilizzato preserva i componenti core da alterazioni termiche accidentali ed evita l’errore umano legato alla miscelazione manuale. L’integrazione con la piattaforma PCR VET riduce l’operatività complessiva a circa un’ora. Le risultanze del test costituiscono un supporto alla rilevazione e devono essere sempre interpretate dal Medico Veterinario in associazione al quadro clinico ed epidemiologico dell’animale.

Team Tecnico BIOLAB Diagnostici – divisione Veterinaria

Biolab è distributore esclusivo Italia di GZ MED