Canidi Anemia 3 (Pannello 6 patogeni) Real Time PCR Detection Kit

REF: GZP050| SKU: 317279|BRAND: GZ MED

Descrizione Scientifica

Il kit Canidi Anemia 3 (Pannello 6 patogeni) Real Time PCR è un sistema diagnostico molecolare avanzato multiplex per l’uso professionale, progettato come ausilio diagnostico e supporto alla rilevazione qualitativa dei principali agenti patogeni associati alle sindromi anemiche infettive e parassitarie nei canidi. Attraverso una singola sessione analitica, il test consente la determinazione simultanea del DNA/RNA dei seguenti 6 bersagli biologici:

• Babesia canis
• Babesia gibsoni
• Borrelia burgdorferi (Malattia di Lyme)
• Ehrlichia spp. (inclusa Ehrlichia canis)
• Anaplasma spp.
• Micoplasmi emotropici (Hemotropic mycoplasmas)

Sfruttando la tecnologia PCR Real Time basata su sonde ad idrolisi TaqMan ed enzimi ad alta efficienza (tra cui trascrittasi inversa per target a RNA e Taq DNA polimerasi con attività esonucleasica 5′-3′), il sistema assicura un’amplificazione accurata e una discriminazione fluorimetrica selettiva dei canali FAM e HEX. Questo esame molecolare Point-of-Care rappresenta un valido strumento per lo screening e l’indagine epidemiologica, riducendo i tempi clinici e superando la soggettività della microscopia ottica tradizionale in contesti di bassa parassitemia o co-infezioni complesse.

Protocollo d’Esecuzione

• Preparazione del Campione: Il campione d’elezione è il sangue intero in EDTA (200 µL). In alternativa, sono supportati campioni liquidi (liquido pleurico, ascite, urina in pozzetto LB) o tamponi (fecali, anali, oculari, nasofaringei) stabilizzati e omogeneizzati nell’apposito reagente di conservazione incluso.
• Estrazione Nucleica Automatizzata: Prelevare le cartucce pre-riempite necessarie e rimuovere la pellicola protettiva superiore. Trasferire 200 µL di campione preparato direttamente nel pozzetto di caricamento contrassegnato come “LB”. Inserire il puntale conduttivo nel primo pozzetto della cartuccia di estrazione.
• Automazione del Processo: Alloggiare correttamente la cartuccia nell’estrattore automatizzato rispettando l’orientamento laterale; il corretto posizionamento è confermato dall’accensione dell’indicatore LED sul rispettivo canale. Avviare il ciclo premendo il tasto “Run”: il processo di isolamento tramite biglie magnetiche si completa in circa 8 minuti.
• Allestimento della Reazione PCR: Al segnale acustico di fine ciclo, recuperare la cartuccia. Prelevare accuratamente 20 µL di acido nucleico purificato dal pozzetto di eluizione “EB” ed immetterli nella provetta contenente il master-mix PCR liofilizzato. Allestire in parallelo una provetta con 20 µL di Controllo Positivo (precedentemente ricostituito con 100 µL di acqua purificata o Elution Buffer).
• Ricostituzione e Avvio Termociclatore: Miscelare picchiettando delicatamente il fondo del tubo con le dita fino alla completa dissoluzione del liofilizzato (clump bianco). Assicurarsi, mediante una breve centrifugazione di 10s o leggera agitazione, che tutto il liquido risieda stabilmente sul fondo e sia privo di bolle d’aria per minimizzare le interferenze del segnale di fondo fluorimetrico. Posizionare nel sistema PCR VET, configurare l’interfaccia e avviare il ciclo termico.
• Interpretazione dei Risultati: L’analisi guidata associa la positività alla presenza di una tipica curva di amplificazione sigmoidea con un valore di Ct < 36 nei rispettivi canali ed ematomi specificati (Tubo 1: FAM=B. canis, HEX=B. gibsoni; Tubo 2: FAM=B. burgdorferi, HEX=Ehrlichia spp.; Tubo 3: FAM=Anaplasma spp., HEX=Micoplasmi emotropici). I campioni con assenza di curve o Ct ≥ 36 sono interpretati come negativi.

Tabella delle Performance e Specifiche Tecniche

Il parere tecnico: L’adozione di questo pannello multiplex Point-of-Care consente di ottenere un profilo esaustivo sullo stato infettivo ed emoparassitario del cane in meno di un’ora, superando la complessità operativa delle sessioni PCR singole. La tecnologia del master mix pre-dosato in forma liofilizzata stabilizza i reagenti da shock termici, minimizza la manipolazione e l’errore umano nell’allestimento. Un risultato negativo supporta il workflow decisionale ma non esclude tassativamente una cinetica d’infezione in fase ultra-precoce o sub-clinica; l’esito diagnostico deve essere integrato con il quadro ematologico, l’osservazione clinica complessiva e ulteriori accertamenti collaterali. L’uso del kit è strettamente riservato a personale medico veterinario qualificato.

Team Tecnico BIOLAB Diagnostici – divisione Veterinaria

Biolab è distributore esclusivo Italia di GZ MED