
Canidi Gastrointestinale 1 (Pannello 4 patogeni) Real Time PCR Detection Kit
REF: GZP053| SKU: 317276|BRAND: GZ MED
Canidi (CPV, CCV-1, GL, Cry)
Tampone fecale o anale
~ 1 Ora
8 Monotest completi
Descrizione Scientifica
Il kit Canidi Gastrointestinale 1 (Pannello 4 patogeni) Real Time PCR Detection Kit è un sofisticato ausilio diagnostico biomolecolare multiplex, sviluppato per la rilevazione qualitativa simultanea e la differenziazione degli acidi nucleici di quattro tra i più diffusi e impattanti patogeni enterici dei canidi: Canine Parvovirus (CPV), αCoronavirus tipo 1 (CCV type 1), Giardia lamblia e Cryptosporidium spp. Sfruttando la tecnologia molecolare della Real Time PCR in un singolo ciclo di corsa, il sistema combina l’azione coordinata di enzimi ad alta fedeltà e di una Taq DNA polimerasi per l’amplificazione parallela e la quantificazione relativa dei target genomici mediante curve cinetiche e valori di Ct.
Questo pannello costituisce un prezioso supporto alla rilevazione precoce, alla diagnosi differenziale e alle indagini epidemiologiche nelle sindromi gastroenteriche acute o croniche dei canidi, consentendo l’identificazione accurata di infezioni singole o co-infezioni complesse direttamente da campioni fecali. Destinato esclusivamente all’uso professionale in vitro da parte di medici veterinari e laboratori di analisi, il saggio garantisce un’eccellente sensibilità analitica, superando i limiti di reattività e le problematiche di falsi negativi tipiche dei test immunocromatografici rapidi tradizionali, e facilitando così l’adozione di tempestive misure terapeutiche e di isolamento.
Protocollo d’Esecuzione
- Preparazione Campione: Raccogliere la matrice biologica tramite il tampone fecale o anale incluso nel kit. Inserire immediatamente il tampone all’interno della provetta contenente il buffer di estrazione e stabilità, spezzando l’asta e agitando vigorosamente per favorire la completa solubilizzazione e il rilascio dei patogeni nel liquido di stabilizzazione.
- Estrazione Nucleica: Aprire la cartuccia monouso pre-riempita per l’estrazione automatizzata a biglie magnetiche rimuovendo la pellicola protettiva superiore. Prelevare accuratamente un volume di 200 µL di campione stabilizzato e inocularlo direttamente nel pozzetto di caricamento contrassegnato con la sigla “LB”.
- Automazione del Processo: Posizionare il puntale magnetico nella prima posizione della cartuccia di estrazione, a sinistra del pozzetto “LB”. Inserire la cartuccia negli alloggiamenti guida del sistema PCR VET dedicato e avviare il protocollo pre-impostato. La procedura guidata si completa automaticamente in circa 8 minuti.
- Allestimento della Reazione PCR: Al termine della fase di estrazione, prelevare accuratamente 20 µL di acido nucleico purificato (DNA/RNA) dal pozzetto di eluizione finale “EB” e trasferirli direttamente all’interno della provetta PCR contenente il master-mix con reagenti liofilizzati.
- Dissoluzione e Ciclo Termico: Miscelare picchiettando delicatamente la provetta per favorire la completa ricostituzione della microsfera liofilizzata. Assicurarsi, tramite una leggera agitazione o breve centrifugazione, che tutto il volume risieda sul fondo e che non vi siano bolle d’aria visibili, per evitare interferenze ottiche e artefatti di segnale. Posizionare le provette nei pozzetti dello strumento e avviare il ciclo termico impostando il programma specifico.
- Interpretazione dei Risultati: I segnali fluorimetrici acquisiti vengono valutati al termine della reazione in base ai canali di emissione e alle curve tipiche di amplificazione cinetica:
- Provetta 1 – Canale FAM: Ct < 36 indica presenza di Canine Parvovirus (Positivo).
- Provetta 1 – Canale HEX: Ct < 36 indica presenza di αCoronavirus tipo 1 (Positivo).
- Provetta 2 – Canale FAM: Ct < 36 indica presenza di Giardia lamblia (Positivo).
- Provetta 2 – Canale HEX: Ct < 36 indica presenza di Cryptosporidium spp. (Positivo).
Valori di Ct non determinati o superiori alla soglia di cutoff indicano la negatività analitica del campione per il rispettivo analita.
Tabella delle Performance Tecniche
| Sensibilità (LOD) | Limite di rilevabilità analitica (LOD) pari a 1000 copie/ml per ciascuno dei quattro target compresi nel pannello gastrointestinale. |
| Precisione (CV) | Verificata mediante ripetibilità intra-seduta su campioni fortemente e debolmente positivi testati per 10 repliche consecutive seriali; i coefficienti di variazione (CV%) dei valori di Ct risultano stabilmente inferiori al 5%. |
| Specificità ed Esclusione | Specificità analitica assoluta comprovata. Il sistema non manifesta cross-reattività o segnali aspecifici verso Campylobacter jejuni, Salmonella enterica, Neospora caninum e Tritrichomonas foetus. |
| Conservazione e Stabilità | Il kit si mantiene stabile per un periodo di 18 mesi dalla data di produzione se conservato correttamente a temperature comprese tra 4°C e 30°C. Al momento dell’uso, verificare l’integrità visiva del pellet liofilizzato (deve presentarsi come aggregato solido bianco); non utilizzare in caso di liquefazione parziale o totale. Le condizioni ambientali operative raccomandate sono comprese tra i 20°C e i 30°C. |
Il parere tecnico: L’adozione di un pannello multiplex in Real-Time PCR ad uso point-of-care consente di accorciare drasticamente i tempi della diagnosi differenziale nelle sindromi gastroenteriche del cane, superando i limiti di sensibilità legati alla carica patogena oscillante o alle limitazioni intrinseche dei comuni test immunocromatografici rapidi. Il condizionamento del master-mix in microsfere stabili liofilizzate preserva l’efficienza degli enzimi d’amplificazione dagli shock termici ambientali, semplificando la gestione logistica in clinica. Trattandosi di un saggio molecolare qualitativo, ogni riscontro analitico costituisce un prezioso supporto alla rilevazione e deve essere interpretato dal Medico Veterinario in associazione al quadro clinico, anamnestico e diagnostico complessivo del paziente.
Team Tecnico BIOLAB Diagnostici – divisione Veterinaria
Biolab è distributore esclusivo Italia di GZ MED


