Canidi Parassiti del Sangue 2 (Pannello 4 patogeni) Real Time PCR Detection Kit

REF: GZP051| SKU: 317216|BRAND: GZ MED

Descrizione Scientifica

Il kit Canidi Parassiti del Sangue 2 (Pannello 4 patogeni) Real Time PCR Detection Kit è un avanzato sistema multiplex di diagnostica biomolecolare point-of-care, sviluppato per la rilevazione qualitativa simultanea e la differenziazione degli acidi nucleici di quattro rilevanti patogeni ematici ed emoparassiti del cane: Borrelia burgdorferi, Ehrlichia spp., Anaplasma spp. e Filaria (Heartworm). Sfruttando la tecnologia molecolare della Real Time PCR in un singolo ciclo d’analisi, il sistema integra in un unico workflow l’azione coordinata di enzimi ad alta fedeltà per l’amplificazione e la quantificazione relativa dei target genomici tramite sonde fluorimetriche e curve cinetiche di Ct.

Questo pannello rappresenta un ausilio diagnostico fondamentale per il supporto alla rilevazione precoce, la diagnosi differenziale e le indagini epidemiologiche in medicina veterinaria, consentendo l’identificazione di infezioni singole o co-infezioni sistemiche trasmesse da vettori direttamente da campioni di sangue intero. Destinato esclusivamente all’uso professionale in vitro da parte di medici veterinari e laboratori di analisi, il saggio offre un’elevatissima specificità clinica, superando i limiti di reattività e le finestre immunologiche tipiche dei test sierologici rapidi tradizionali, ottimizzando così la tempestività dell’approccio terapeutico.

Protocollo d’Esecuzione

• Preparazione Campione: Utilizzare campioni di sangue intero canino raccolto in provette provviste di anticoagulante (EDTA). Agitare delicatamente per inversione. Prelevare accuratamente un volume di 200 µL di sangue intero e addizionarlo direttamente all’interno della provetta contenente il buffer di lisi e conservazione del campione, miscelando a fondo per stabilizzare gli acidi nucleici target.
• Estrazione Nucleica: Aprire la cartuccia monouso pre-riempita per l’estrazione automatizzata a biglie magnetiche rimuovendo la pellicola protettiva superiore. Trasferire l’intero volume del campione stabilizzato nel pozzetto di caricamento contrassegnato con la sigla “LB”.
• Automazione del Processo: Posizionare il puntale magnetico nella prima posizione della cartuccia di estrazione, a sinistra del pozzetto “LB”. Inserire la cartuccia nell’estrattore e avviare il ciclo di estrazione automatica tramite l’interfaccia. La procedura guidata si completa in circa 8 minuti e un segnale acustico avviserà del termine del processo.
• Allestimento della Reazione PCR: Prelevare accuratamente 20 µL di acido nucleico purificato (DNA/RNA) dal pozzetto di eluizione finale “EB” utilizzando una pipetta sterile con un nuovo puntale e trasferirli direttamente nella provetta PCR contenente il master-mix con reagenti liofilizzati.
• Dissoluzione e Ciclo Termico: Ricostituire e sciogliere interamente la master-mix liofilizzata picchiettando leggermente il fondo della provetta con le dita. Assicurarsi, tramite una leggera agitazione o breve centrifugazione, che tutto il volume di reazione risieda sul fondo e che non vi siano bolle d’aria visibili, al fine di prevenire forti interferenze del segnale di fondo fluorimetrico. Posizionare le provette nei pozzetti dello strumento Real-Time PCR e avviare il programma specifico che viene rilevato dalla pistola barcode leggendo il QRcode presente sulla confezione della provetta master-mix.
• Interpretazione dei Risultati: I segnali fluorimetrici acquisiti vengono valutati al termine della reazione in base ai canali di emissione e alle curve tipiche di amplificazione cinetica:
  • Provetta 1 – Canale FAM: Ct < 36 indica presenza di Borrelia burgdorferi (Positivo).
  • Provetta 1 – Canale HEX: Ct < 36 indica presenza di Ehrlichia spp. (Positivo).
  • Provetta 2 – Canale FAM: Ct < 36 indica presenza di Anaplasma spp. (Positivo).
  • Provetta 2 – Canale HEX: Ct < 36 indica presenza di Filaria / Heartworm (Positivo).

  Valori di Ct non determinati (pari a 0) o superiori alla soglia di cutoff indicano la negatività analitica del campione per il rispettivo parassita o batterio ematico.

Tabella delle Performance Tecniche

Il parere tecnico: L’impiego diagnostico di un pannello multiplex in Real-Time PCR Point-of-Care consente di identificare e differenziare tempestivamente i vettori emoparassitari e batterici nei canidi, aggirando i periodi di latenza o i limiti di sensibilità legati alle fluttuazioni dei titoli anticorpali riscontrabili nei test rapidi immunocromatografici o ELISA tradizionali. Il condizionamento del master-mix in microsfere liofilizzate stabili ne preserva l’efficienza enzimatica contro gli shock termici ambientali, eliminando l’obbligo della catena del freddo per lo stoccaggio logistico. Essendo un saggio molecolare qualitativo, l’esito analitico rappresenta un supporto alla rilevazione che deve essere sempre valutato dal Medico Veterinario e integrato nel contesto del quadro clinico e anamnestico del paziente.

Team Tecnico BIOLAB Diagnostici – divisione Veterinaria

Biolab è distributore esclusivo Italia di GZ MED