Clamidia / Mycoplasma Real Time PCR Detection Kit

REF: GZP032| SKU: 317251|BRAND: GZ MED

Descrizione Scientifica

Il kit Chlamydia/Mycoplasma Real Time PCR Detection Kit è un sistema di diagnostica biomolecolare Multiplex avanzato, specificamente sviluppato per la rilevazione qualitativa simultanea e la differenziazione degli acidi nucleici di Chlamydia psittaci/felis e Mycoplasma felis nella specie felina. Sfruttando la tecnologia PCR in un unico step (one-step RT-PCR), il kit combina una trascrittasi inversa altamente efficiente con una Taq DNA polimerasi Hot-Start per l’amplificazione parallela di regioni geniche altamente conservative dei due patogeni batterici. Formulato esclusivamente per l’uso professionale diagnostico in vitro, questo kit rappresenta uno strumento analitico essenziale per la diagnosi differenziale tempestiva degli agenti patogeni associati a congiuntiviti, cheratiti e patologie infettive a carico delle prime vie respiratorie (complesso della rinotracheite felina).

Protocollo d’Esecuzione

• Preparazione Campione: Eseguire il campionamento utilizzando i tamponi sterili forniti nel kit, raccogliendo l’escrezione dalle mucose target (oculare, nasale o faringea). Inserire immediatamente il tampone nel tubo del reagente di conservazione del campione, agitandolo vigorosamente per consentire la completa sospensione e stabilizzazione del materiale biologico nel liquido.
• Estrazione Nucleica: Pipettare accuratamente 200µL del liquido di sospensione così ottenuto e trasferirli direttamente nel pozzetto contrassegnato dalla sigla “LB” nella cartuccia di estrazione monouso pre-riempita.
• Automazione: Posizionare il puntale conduttivo nella prima posizione della cartuccia di estrazione, a sinistra del pozzetto “LB”. Inserire la cartuccia nell’estrattore e avviare il ciclo di estrazione automatica tramite l’interfaccia. La procedura guidata si completa in circa 8 minuti e un segnale acustico avviserà del termine del processo.
• Allestimento della PCR: Prelevare con precisione 20µL di acido nucleico purificato dal pozzetto d’eluizione “EB” e addizionarli direttamente nella provetta PCR contenente il mix di reazione liofilizzato. Per impostare il controllo positivo, ricostituire il relativo pellet liofilizzato con 100µL di acqua purificata o Elution Buffer e trasferirne 20µL in una provetta PCR separata.
• Analisi: Dissolvere completamente la microsfera liofilizzata picchiettando leggermente il fondo della provetta, prestando massima cura a non introdurre bolle d’aria. Sincerarsi che tutto il liquido risieda sul fondo, quindi inserire la provetta nel blocco termico dello strumento Real-Time PCR per dare inizio al ciclo termico di amplificazione.
• Interpretazione dei Risultati: Il campione analizzato è da considerarsi Positivo per Chlamydia se mostra una curva ad “S” con valore di Ct < 36 nel canale FAM. Il campione è da considerarsi Positivo per Mycoplasma se si rileva una curva ad “S” con valore di Ct < 36 nel canale VIC/HEX. La validità della seduta analitica è confermata da un Ct < 32 per il controllo positivo su entrambi i canali.

Tabella delle Performance Tecniche

Il parere tecnico: L’esecuzione clinica in Multiplex integrata in un singolo pozzetto d’analisi riduce sensibilmente i passaggi manuali, massimizzando l’efficienza diagnostica a partire da un unico tampone congiuntivale o nasale. Il confezionamento del master-mix in forma sferica liofilizzata elimina la deperibilità legata agli sbalzi di temperatura e solleva la struttura dall’obbligo del mantenimento della catena del freddo, incrementando la standardizzazione analitica point-of-care. Trattandosi di un esame biologico-molecolare qualitativo, i risultati ottenuti devono sempre essere integrati nel giudizio diagnostico complessivo formulato dal Medico Veterinario curante.

Team Tecnico BIOLAB Diagnostici – divisione Veterinaria

Biolab è distributore esclusivo Italia di Gangzhu Medical (GZ MED)