GZ MED Coronavirus Respiratorio per Canidi Real Time PCR Detection Kit

REF: GZP076| SKU: 317296| BRAND: GZ MED

Descrizione Scientifica

Il kit GZ MED Coronavirus Respiratorio per Canidi Real Time PCR costituisce un’architettura molecolare avanzata per la determinazione qualitativa e la differenziazione rapida dell’RNA del Coronavirus Respiratorio Canino (CRCoV), agente eziologico cardine del complesso delle malattie respiratorie infettive canine (CIRD). Basato sulla tecnologia della PCR Real Time con trascrittasi inversa accoppiata a sonde fluorogeniche ad idrolisi, il saggio fornisce un sensibile supporto alla rilevazione degli acidi nucleici virali direttamente da matrici biologiche respiratorie, eliminando la necessità di complessi isolamenti colturali o indagini sierologiche retrospettive.

Questo test qualitativo per uso professionale si configura come un moderno ausilio diagnostico destinato in via esclusiva a Medici Veterinari, Ambulatori Veterinari e Cliniche Veterinarie. L’impiego della PCR automatizzata Point-of-Care permette di superare i limiti di sensibilità dei comuni test immunocromatografici rapidi latenti, garantendo una discriminazione accurata dello stato infettivo nelle prime fasi cliniche. La strutturazione del kit in comodi monotest pre-allestiti minimizza i passaggi manuali di pipettamento, riducendo drasticamente il rischio di contaminazione crociata da aerosol e massimizzando l’efficienza dei flussi Point-of-Care in sinergia esclusiva con il sistema estrattivo e termociclatore PCR VET di Gangzhu Medical.

Protocollo d’Esecuzione

• Preparazione Campione:
  
  • Campioni liquidi (Versamento pleurico, ascite, sangue intero in EDTA o liquidi biologici): Inoculare 200 µL di campione direttamente all’interno della provetta contenente il diluente di conservazione, quindi agitare e miscelare con cura per l’omogeneizzazione. Per i campioni di urina, inoculare 200 µL direttamente nel pozzetto di lisi “LB” della cartuccia.
  
  • Campioni su tampone (tamponi oculari, nasali, faringei o fecali): Raccogliere il materiale tramite il tampone clinico monouso campionando a fondo le secrezioni orofaringee o nasali. Inserire il tampone nel buffer di conservazione, agitare vigorosamente per facilitare la completa sospensione e dissoluzione dei patogeni, quindi spezzare l’asta nell’apposito punto di frattura prima di richiudere.
• Estrazione Nucleica Automatizzata: Prelevare le cartucce monouso di estrazione necessarie per la sessione di lavoro e rimuovere delicatamente la pellicola protettiva superiore in alluminio. Trasferire esattamente 200 µL della sospensione o del campione biologico preparato nel pozzetto di lisi contrassegnato dalla sigla “LB” (Lysis Buffer).
• Automazione del Processo: Alloggiare il puntale conduttivo per estrazione (magnetic rod sleeve) nella posizione dedicata contrassegnata dal simbolo “O”, situata immediatamente a sinistra del pozzetto “LB”. Inserire la cartuccia nell’apposito modulo dell’estrattore automatizzato PCR VET e avviare il protocollo preimpostato premendo “Run”. Il ciclo robotizzato a sfere magnetiche si conclude autonomamente in circa 8 minuti ed è notificato da un segnale acustico.
• Preparazione della Reazione PCR: Prelevare con cura 20 µL di acido nucleico purificato ed eluito dal pozzetto finale “EB” utilizzando una micropipetta e un puntale sterile con filtro. Trasferire il volume direttamente nella provetta eppendorf contenente la master-mix con reagenti liofilizzati. In caso di impiego del Controllo Positivo, ricostituire il liofilizzato bianco in cluster aggiungendo 100 µL di acqua purificata o Elution Buffer sterile e trasferirne 20 µL nella provetta PCR corrispondente.
• Dissoluzione e Avvio Ciclo Termico: Ricostituire completamente la master-mix liofilizzata picchiettando delicatamente il fondo della provetta con le dita. Assicurarsi, mediante una breve centrifugazione di 10 secondi o un deciso movimento discendente, che tutto il liquido risieda stabilmente sul fondo e che non vi siano bolle d’aria residue, potenziali fonti di interferenza fluorimetrica o di artefatti analitici. Inserire le provette nel termociclatore Real Time PCR VET, configurare i canali tramite software e avviare il profilo termico.
• Interpretazione Risultati: Il software analitico discrimina la presenza dei singoli target combinando i canali di emissione e i valori di Cycle Threshold (Ct):
  
  • Risultato Positivo: Comparsa di una cinetica di amplificazione tipica a forma di “S” accoppiata a un valore di Ct < 36 nel canale specifico del patogeno target.
  
  • Risultato Negativo: Assenza di curva di amplificazione o valore Ct uguale a 0 oppure ≥ 36. Un esito negativo riduce la probabilità di infezione attiva da Coronavirus respiratorio ma deve essere sempre valutato dal clinico nel contesto clinico generale.

Tabella delle Performance

Il parere tecnico: Questo pannello molecolare rappresenta uno strumento diagnostico d’elezione per l’identificazione precoce e accurata del Coronavirus Respiratorio Canino (CRCoV) nei canidi. Trattandosi di un’entità patogena ad elevata contagiosità nel contesto di canili e cliniche, la sensibilità e la rapidità garantite dalla RT-PCR a sonda riducono in modo drastico i tempi di isolamento clinico. La stabilità del master-mix liofilizzato preserva i componenti core da alterazioni termiche accidentali ed evita l’errore umano legato alla miscelazione manuale. L’integrazione con la piattaforma PCR VET riduce l’operatività complessiva a circa un’ora. Le risultanze del test costituiscono un supporto alla rilevazione e devono essere sempre interpretate dal Medico Veterinario in associazione al quadro clinico ed epidemiologico dell’animale.

Team Tecnico BIOLAB Diagnostici – divisione Veterinaria

Biolab è distributore esclusivo Italia di GZ MED