Criptosporidio spp. / Helicobacter pylori per Canidi e Felini Real Time PCR

REF: GZP073| SKU: 317312|BRAND: GZ MED

Descrizione Scientifica

Il kit Cryptosporidium spp. / Helicobacter pylori Real Time PCR è un sistema di diagnosi molecolare avanzato per l’identificazione qualitativa e simultanea del materiale genetico (DNA/RNA) di due tra i più rilevanti agenti patogeni associati a disturbi gastrointestinali, enterici e gastrici nei piccoli animali: Cryptosporidium spp. e Helicobacter pylori. Sfruttando la tecnologia PCR Real Time Multiplex accoppiata a sonde fluorofore a idrolisi ad alta specificità, il kit agisce come un efficiente supporto alla rilevazione clinica e all’indagine epidemiologica direttamente da campioni biologici, superando i limiti di sensibilità dei tradizionali test immunologici o microscopici, specialmente nelle fasi precoci, latenti o a bassa carica parassitaria/batterica.

Protocollo d’Esecuzione

• Raccolta del Campione: Utilizzare campioni da tampone fecale o anale. Raccogliere un’adeguata quantità di matrice tramite il tampone monouso; per i tamponi anali, inumidire preventivamente con il buffer di diluizione. Dopo il campionamento, inserire il tampone nella provetta contenente il reagente di conservazione, spezzare l’asta e agitare per favorire la completa dissoluzione dei patogeni nel liquido.
• Fase di Estrazione Nucleica: Estrarre la cartuccia monouso pre-riempita per l’estrazione automatizzata a biglie magnetiche e rimuovere la pellicola protettiva superiore. Trasferire 200 µL di campione biologico preparato nel pozzetto di caricamento contrassegnato con la sigla “LB”.
• Automazione dell’Estrazione: Posizionare il puntale conduttivo nella prima posizione della cartuccia di estrazione, a sinistra del pozzetto “LB”. Inserire la cartuccia nell’estrattore automatizzato del sistema PCR VET e avviare il protocollo. Il ciclo si completa autonomamente in circa 8 minuti.
• Allestimento della Reazione PCR: Prelevare con cura 20 µL di acido nucleico purificato (eluato) dal pozzetto finale “EB” e trasferirli direttamente all’interno della provetta contenente il master-mix liofilizzato GZ MED.
• Dissoluzione e Caricamento: Ricostituire completamente la master-mix liofilizzata picchiettando leggermente il fondo della provetta con le dita. Assicurarsi, tramite una leggera agitazione o breve centrifugazione, che tutto il volume risieda sul fondo e che non vi siano bolle d’aria per evitare interferenze fluorimetriche. Posizionare le provette nello strumento Real Time PCR ed eseguire la scansione del codice QR presente sulla confezione per caricare automaticamente il profilo termico corretto.
• Interpretazione dei Risultati: L’interfaccia software analizza automaticamente le curve di amplificazione. Il risultato è considerato un valido ausilio diagnostico con esito Positivo per valori di Ct < 36 nel rispettivo canale di fluorescenza (FAM per Cryptosporidium spp. / HEX per Helicobacter pylori).

Tabella delle Performance

Il parere tecnico: L’adozione di un pannello Multiplex in Real Time PCR rappresenta un’evoluzione cruciale nell’approccio diagnostico alle infezioni gastrointestinali miste nei piccoli animali. Consentendo la differenziazione contemporanea di un protozoo parassita e di un patogeno batterico gastrico da un unico workflow, riduce in modo significativo i tempi clinici e ottimizza l’efficienza operativa del laboratorio interno. La formulazione in master-mix liofilizzata monodosata stabilizza i componenti esenziali escludendo i rischi di degradazione termica. Trattandosi di un ausilio diagnostico per uso professionale, i risultati emersi devono essere opportunamente contestualizzati dal Medico Veterinario in relazione al quadro clinico e anamnestico complessivo del paziente.

Team Tecnico BIOLAB Diagnostici – divisione Veterinaria

Biolab è distributore esclusivo Italia di GZ MED