Anemia B per Felini
Candidatus M. haemominutum, Candidatus M. turicensis, M. haemofelis, Bartonella henselae, FIV e FeLV
Pannello Real Time PCR 6 Patogeni Multiplex

REF: GZP089| SKU: 317308| BRAND: GZ MED

Descrizione Scientifica

Il kit GZ MED Anemia B per Felini Real Time PCR Multiplex è una configurazione molecolare avanzata ad ampio spettro ingegnerizzata per la determinazione qualitativa e la differenziazione simultanea di 6 tra i più critici e complessi agenti patogeni ad interessamento ematico e sistemico nel gatto: Candidatus Mycoplasma haemominutum, Candidatus Mycoplasma turicensis, Mycoplasma haemofelis (agenti dell’anemia infettiva felina o emobartonellosi), Bartonella henselae, nonché i retrovirus immunocompromettenti FIV (Virus dell’Immunodeficienza Felina) e FeLV (Virus della Leucemia Felina). Sfruttando la specificità e la sensibilità della PCR Real Time accoppiata a sonde fluoroforiche a idrolisi, il sistema garantisce un robusto supporto alla rilevazione diretta degli acidi nucleici (DNA/RNA) estratti da matrici complesse.

Questo test qualitativo per uso professionale si configura come un moderno ausilio diagnostico destinato in via esclusiva a Medici Veterinari, Ambulatori Veterinari e Cliniche Veterinarie. Consente di superare le storiche limitazioni di sensibilità dei test rapidi immunocromatografici o delle osservazioni microscopiche dirette su striscio ematico, offrendo una mappatura esaustiva ed accurata dei quadri anemici acuti, cronici o caratterizzati da co-infezioni multi-patogeno e retrovirali. La strutturazione del kit in comodi monotest pre-allestiti riduce sensibilmente i passaggi manuali di pipettamento, minimizzando il rischio di contaminazione crociata da aerosol e ottimizzando l’efficienza dei flussi Point-of-Care in sinergia esclusiva con il sistema integrato di estrazione e termociclazione PCR VET di Gangzhu Medical.

Protocollo d’Esecuzione

• Preparazione Campione:

  • Campioni liquidi (Sangue intero in EDTA, effusioni pleuriche, ascite): Trasferire accuratamente 200 µL di matrice liquida nella provetta contenente la soluzione diluente di conservazione, quindi agitare e miscelare a fondo per omogeneizzare la sospensione prima dell’uso. Per campioni di urina, inserire 200 µL direttamente nel pozzetto di lisi “LB” della cartuccia.

  • Tamponi clinici (oculari, nasofaringei, rettali): Raccogliere il materiale biologico con il tampone sterile. Inserire il tampone nella provetta con la soluzione di conservazione, agitare vigorosamente per facilitare il rilascio stabile dei patogeni nel buffer, quindi spezzare l’asta nell’apposito punto di frattura prima di richiudere.

• Estrazione Nucleica Automatizzata: Prelevare le cartucce monouso di estrazione necessarie per la sessione analitica e rimuovere delicatamente il sigillo superiore in alluminio. Trasferire esattamente 200 µL del campione liquido preparato o della sospensione da tampone all’interno del pozzetto di lisi contrassegnato dalla sigla “LB” (Lysis Buffer).
• Automazione del Processo: Alloggiare il puntale conduttivo per estrazione (magnetic rod sleeve) nella posizione dedicata contrassegnata dal simbolo “O”, posizionata immediatamente a sinistra del pozzetto “LB”. Posizionare la cartuccia sul rotore o nel modulo dell’estrattore automatizzato PCR VET rispettando l’orientamento corretto e avviare il protocollo preimpostato premendo “Run”. Il ciclo robotizzato si conclude autonomamente in circa 8 minuti ed è notificato da un segnale acustico.
• Preparazione della Reazione PCR: Prelevare con precisione 20 µL di acido nucleico purificato ed eluito dal pozzetto finale “EB” utilizzando una micropipetta idonea e un puntale sterile dotato di filtro. Trasferire il volume direttamente nella provetta eppendorf contenente il mix di amplificazione liofilizzato. In caso di impiego del Controllo Positivo, ricostituire il liofilizzato bianco in cluster addizionando 100 µL di acqua purificata o Elution Buffer sterile e trasferirne 20 µL nella corrispondente provetta PCR.
• Dissoluzione e Avvio Ciclo Termico: Dissolvere completamente la master-mix liofilizzata picchiettando leggermente il fondo della provetta con le dita. Assicurarsi, mediante una breve centrifugazione di 10 secondi o un deciso movimento discendente, che tutto il liquido risieda stabilmente sul fondo e che non vi siano bolle d’aria residue, potenziali fonti di interferenza fluorimetrica. Inserire le provette nel termociclatore Real Time PCR VET, mappare i campioni a software e avviare il profilo termico.
• Interpretazione Risultati: Il software analitico discrimina la presenza dei singoli target combinando i canali di emissione e i valori di Cycle Threshold (Ct):
  • Risultato Positivo: Comparsa di una cinetica di amplificazione tipica a forma di “S” accoppiata a un valore di Ct < 36 nel canale fluorimetrico specifico del patogeno target.
  • Risultato Negativo: Assenza di curva di amplificazione o valore Ct uguale a 0 oppure ≥ 36.

Tabella delle Performance

Il parere tecnico: Questo pannello molecolare multiplex rappresenta uno strumento diagnostico d’elezione e di cruciale importanza nella gestione clinica delle sindromi anemiche ed infettive feline. Consentendo la rilevazione differenziale e simultanea di sei target core – comprese le tre principali specie di micoplasmi emotrofici responsabili di emolisi acuta, la Bartonella e lo screening retrovirale FIV/FeLV – il kit ottimizza le risposte terapeutiche d’urgenza riducendo drasticamente i tempi di latenza diagnostica. La stabilità del master-mix liofilizzato preserva i reagenti core da shock termici accidentali e standardizza il saggio escludendo errori di miscelazione manuale. L’integrazione con la piattaforma PCR VET riduce l’operatività complessiva a circa un’ora. Le risultanze del test forniscono un supporto alla rilevazione che deve essere sempre interpretato dal Medico Veterinario in associazione al quadro clinico ed epidemiologico dell’animale.

Team Tecnico BIOLAB Diagnostici – divisione Veterinaria

Biolab è distributore esclusivo Italia di GZ MED