Leucemia Felina / Virus dell’immunodeficienza Felina Real Time PCR Detection Kit

REF: GZP042 | SKU: 317287 | BRAND: GZ MED

Descrizione Scientifica

Il kit Leucemia Felina / Virus dell’immunodeficienza Felina Real Time PCR Detection Kit è un sistema di diagnostica biomolecolare Multiplex ad altissima sensibilità, sviluppato per la rilevazione qualitativa simultanea e la differenziazione degli acidi nucleici del Virus dell’Immunodeficienza Felina (FIV, target RNA) e del Virus della Leucemia Felina (FeLV, target RNA/DNA provirale). Sfruttando la tecnologia avanzata 1-step RT-PCR, il kit integra l’azione di una trascrittasi inversa ad alta fedeltà e di una Taq DNA polimerasi Hot-Start per l’amplificazione parallela di sequenze geniche altamente conservative all’interno di un singolo pozzetto d’analisi. Concepito esclusivamente per l’uso diagnostico professionale in vitro, questo pannello rappresenta il gold standard molecolare point-of-care per l’identificazione precoce dei retrovirus felini, superando i limiti di sensibilità temporale dei comuni test sierologici immunocromatografici (fasi di eziologia precoce o periodi finestra).

Protocollo d’Esecuzione

• Preparazione Campione: Utilizzare campioni di sangue intero felino raccolto in provette provviste di anticoagulante (EDTA). Agitare delicatamente per inversione. Prelevare accuratamente 200µL di sangue intero e addizionarli direttamente all’interno del tubo contenente il reagente di conservazione e lisi del campione, miscelando a fondo per stabilizzare gli acidi nucleici target.
• Estrazione Nucleica: Trasferire l’intero volume del campione stabilizzato nel pozzetto contrassegnato con la sigla “LB” nella cartuccia monouso pre-riempita per l’estrazione automatizzata a biglie magnetiche.
• Automazione: Posizionare il puntale magnetico nella prima posizione della cartuccia di estrazione, a sinistra del pozzetto “LB”. Inserire la cartuccia nell’estrattore e avviare il ciclo di estrazione automatica tramite l’interfaccia. La procedura guidata si completa in circa 8 minuti e un segnale acustico avviserà del termine del processo.
• Allestimento della PCR: Prelevare accuratamente 20µL di acido nucleico purificato dal pozzetto d’eluizione finale “EB” e inocularli direttamente nella provetta PCR contenente il master-mix pre-liofilizzato. Per impostare il controllo positivo di sessione, ricostituire la microsfera liofilizzata del controllo positivo con 100µL di acqua purificata o Elution Buffer e trasferirne 20µL in una provetta PCR separata.
• Analisi: Sciogliere interamente il pellet liofilizzato picchiettando leggermente il fondo della provetta, prestando assoluta attenzione a evitare la formazione di bolle d’aria. Assicurarsi che tutto il liquido risieda perfettamente sul fondo della provetta e posizionarla nel blocco termico dello strumento Real-Time PCR per dare inizio al ciclo termico di amplificazione.
• Interpretazione dei Risultati: Il campione analizzato è considerato Positivo per FIV se presenta una curva ad “S” con valore di Ct < 36 nel canale FAM. Il campione è considerato Positivo per FeLV se presenta una curva ad “S” con valore di Ct < 36 nel canale VIC/HEX. La validità analitica della corsa richiede un valore di Ct < 32 per il controllo positivo su entrambi i test.

Tabella delle Performance Tecniche

Il parere tecnico: L’impiego diagnostico della PCR in Real-Time Point-of-Care per FIV e FeLV permette di superare i tassi di falsi negativi legati alla bassa produzione anticorpale nelle prime fasi dell’infezione o ai limiti dei test ELISA tradizionali. Il condizionamento in microsfere liofilizzate stabili protegge l’efficienza degli enzimi dai danni da escursione termica, eliminando l’obbligo del trasporto refrigerato o del congelamento. Essendo un saggio molecolare qualitativo ad altissima sensibilità, l’esito deve sempre essere valutato dal Medico Veterinario e inserito nel contesto anamnestico, clinico e vaccinale del paziente felino.

Team Tecnico BIOLAB Diagnostici – divisione Veterinaria

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