Parrot Beak and Feather Disease Virus Real Time PCR Detection Kit

REF: GZEP002| SKU: 317218|BRAND: GZ MED

Descrizione Scientifica

Il kit Parrot Beak and Feather Disease Virus Real Time PCR è un sistema diagnostico molecolare avanzato per l’identificazione qualitativa del DNA del Circovirus responsabile della Malattia del Becco e delle Piume (PBFD) nei pappagalli e in altre specie di volatili. Sfruttando la tecnologia PCR Real Time basata su sonde ad idrolisi ad alta specificità, il kit offre una rilevazione diretta e precoce del patogeno. Si configura come un fondamentale ausilio diagnostico e supporto alla rilevazione clinica ed epidemiologica, superando i limiti dei metodi osservativi tradizionali soprattutto nelle fasi asintomatiche o iniziali dell’infezione. Il sistema integra un controllo interno per monitorare l’intero flusso analitico: dalla corretta raccolta del campione, all’efficacia dell’estrazione degli acidi nucleici, fino alla fase finale di amplificazione enzimatica. Sviluppato per uso professionale esclusivo, questo test qualitativo è ottimizzato per l’impiego in combinazione con il sistema PCR VET di Gangzhu Medical.

Protocollo d’Esecuzione

• Campionamento e Pretrattamento:

  • Piume: Utilizzare pinzette sterili per inserire nel buffer di lisi 3-4 piume nuove prelevate dal petto (non cadute naturalmente), preferendo il calamo.

  • Tampone/Carta assorbente: Tagliare con forbici sterili la porzione che ha assorbito il sangue e inserirla nel buffer di lisi.

  • Sangue intero EDTA: Pipettare direttamente 20 µL di sangue all’interno del tubo del buffer di lisi.

• Estrazione Nucleica: Aggiungere 20 µL di Proteinasi K al tubo del buffer di lisi contenente il campione. Agitare al vortex per 10 secondi, lasciare a temperatura ambiente (20-40 °C) per 15 minuti (miscelando più volte) e centrifugare. Trasferire l’intero volume del liquido surnatante (escludendo le piume) nel pozzetto di caricamento “LB” della cartuccia monouso pre-riempita e aggiungere nello stesso pozzetto 20 µL di sospensione di biglie magnetiche.
• Automazione del Processo: Posizionare il puntale conduttivo nella prima posizione della cartuccia di estrazione, a sinistra del pozzetto “LB”. Inserire la cartuccia nell’estrattore automatizzato rispettando l’orientamento indicato lateralmente; verificare l’accensione dell’indicatore LED rosso e avviare il protocollo premendo il tasto “Run”. La procedura guidata si completa in circa 8 minuti e un segnale acustico avviserà del termine del processo.
• Allestimento della Reazione PCR: Prelevare accuratamente 20 µL di acido nucleico purificato dal pozzetto di eluizione finale “EB” utilizzando una pipetta sterile con un nuovo puntale e trasferirli direttamente nella provetta PCR contenente il master-mix con reagenti liofilizzati.
• Dissoluzione e Ciclo Termico: Ricostituire e sciogliere interamente la master-mix liofilizzata picchiettando leggermente il fondo della provetta con le dita. Assicurarsi, tramite una leggera agitazione o breve centrifugazione per 10 secondi, che tutto il volume di reazione risieda sul fondo e che non vi siano bolle d’aria visibili, al fine di prevenire forti interferenze del segnale di fondo fluorimetrico. Posizionare le provette nei pozzetti dello strumento Real-Time PCR VET e avviare il programma specifico.
• Interpretazione Risultati: L’analisi è guidata dall’interfaccia basata sulle curve di amplificazione. Un campione mostra un risultato Positivo in presenza di una tipica curva di amplificazione a forma di S con un valore di Ct < 36. Il risultato è considerato Negativo se non si osserva una curva tipica e il valore di Ct = 0 o Ct ≥ 36.

Tabella delle Performance

Il parere tecnico: L’applicazione clinica professionale di questo sistema Point-of-Care consente di ottimizzare le tempistiche diagnostiche nell’identificazione del virus della Malattia del Becco e delle Piume. L’adozione di master mix liofilizzate pre-dosate preserva l’integrità dei componenti da alterazioni termiche accidentali e riduce in modo significativo la variabilità legata alle operazioni manuali di pipettamento. L’integrazione del flusso operativo con il sistema PCR VET assicura l’ottenimento di riscontri oggettivi in circa un’ora, fondamentali per l’adozione tempestiva di misure di isolamento o biosicurezza negli allevamenti o nelle cliniche. I risultati del test rappresentano un ausilio diagnostico e vanno sempre interpretati dal Medico Veterinario sulla base del quadro clinico e anamnestico dell’animale.

Team Tecnico BIOLAB Diagnostici – divisione Veterinaria

Biolab è distributore esclusivo Italia di GZ MED