Mycoplasma Real Time PCR Detection Kit
REF: GZP025| SKU: 317275|BRAND: GZ MED
Canidi e Felini
Tampone oculare, nasale, faringeo
~ 1 Ora
8 Monotest completi
Descrizione Scientifica
Il kit Mycoplasma Real Time PCR è un sistema diagnostico molecolare avanzato per l’identificazione qualitativa del DNA/RNA di Micoplasma nei canidi e nei felini. Sfruttando la tecnologia PCR Real Time one-step basata su sonde a idrolisi ad alta specificità combinata a una retrotrascrittasi ad alta efficienza, il kit offre una rilevazione diretta e precoce del microrganismo a livello di mucose respiratorie e oculari.
Sottotipi e specie rilevati dal test:
- Mycoplasma felis
- Mycoplasma cynos
- Mycoplasma canis
Questo esame molecolare si configura come un eccellente ausilio diagnostico e supporto alla rilevazione clinica ed epidemiologica delle infezioni croniche o acute, superando le limitazioni colturali dovute alla natura esigente del patogeno. Il sistema è ottimizzato per l’uso professionale esclusivo in vitro in combinazione nativa con il sistema PCR VET di Gangzhu Medical.
Protocollo d’Esecuzione
- Raccolta Campione: Eseguire il campionamento tramite tampone strofinando sotto la palpebra per i campioni oculari, oppure raccogliendo l’escrezione orofaringea e nasale per i campioni nasofaringei. Inserire rapidamente il tampone nel tubo del reagente di conservazione, spezzare l’asta ed agitare per ridistribuire i patogeni nel buffer.
- Estrazione Nucleica: Estrarre le cartucce monouso pre-riempite necessarie e rimuovere la pellicola protettiva superiore. Trasferire accuratamente 200 µL di campione liquido nel pozzetto di caricamento contrassegnato come “LB”.
- Automazione del Processo: Posizionare il puntale conduttivo nella prima posizione della cartuccia di estrazione a sinistra del pozzetto “LB”. Allineare la cartuccia nell’estrattore automatizzato; il corretto posizionamento attiva l’indicatore LED rosso del canale di riferimento. Avviare il ciclo premendo “Run”: l’estrazione automatica si completa in circa 8 minuti.
- Allestimento della Reazione PCR: Prelevare accuratamente 20 µL di acido nucleico purificato dal pozzetto di eluizione finale “EB” utilizzando una pipetta di precisione con blocco al primo scatto e trasferirli direttamente nella provetta PCR contenente la master-mix con reagenti liofilizzati.
- Dissoluzione e Ciclo Termico: Ricostituire la master-mix liofilizzata picchiettando leggermente il fondo della provetta con le dita per assicurarne la completa solubilizzazione. Agitare o centrifugare brevemente per 10 secondi per portare tutto il liquido sul fondo evitando la formazione di bolle d’aria. Alloggiare la provetta nel sistema Real-Time PCR VET e lanciare il programma specifico associato al codice a barre.
- Interpretazione Risultati: Monitorare l’emissione del segnale fluorimetrico nel canale FAM. Un campione è considerato Positivo in presenza di una tipica curva di amplificazione sigmoidea con un valore di Ct < 36. Un valore di Ct pari a 0 o ≥ 36 indica l’assenza di rilevazione quantificabile (Risultato Negativo).
Tabella delle Performance
| Sensibilità (LOD) | 1000 copie/ml |
| Riproducibilità (CV) | < 5% (Coefficiente di variazione sui valori Ct calcolato su 10 ripetizioni consecutive di campioni positivi) |
| Specificità d’Infezione | Elevata specificità analitica per Mycoplasma; assenza di cross-reattività con Calicivirus Felino (FCV), Herpesvirus Felino tipo I (FHV-1), Chlamydia, Bordetella bronchiseptica e Influenza A Virus. |
| Conservazione e Stabilità | Stoccaggio controllato tra 4 – 30 °C | Validità del kit: 18 mesi. Temperatura operativa ambientale raccomandata: 20 – 30 °C. |
Il parere tecnico: L’adozione standardizzata di questo test molecolare in Point-of-Care rappresenta un’evoluzione fondamentale per l’inquadramento clinico dei complessi respiratori e delle patologie oculari infettive nei piccoli animali. L’utilizzo di master-mix liofilizzate pre-dosate scherma i componenti critici dal deterioramento termico e previene gli errori procedurali di pipettamento manuale. L’integrazione del flusso analitico con il sistema PCR VET restituisce un riscontro oggettivo in circa un’ora, consentendo l’implementazione precoce di protocolli terapeutici mirati e misure di isolamento. I risultati del test si intendono come supporto alla rilevazione e devono essere validati dal Medico Veterinario sulla base dell’esame obiettivo generale.
Team Tecnico BIOLAB Diagnostici – divisione Veterinaria
Biolab è distributore esclusivo Italia di GZ MED


