Parvovirus / ALFA Coronavirus type 1 Real Time PCR Detection Kit

REF: GZP031 | SKU: 317225 | BRAND: GZ MED

Descrizione Scientifica

Il kit Parvovirus/αCoronavirus type 1 Real Time PCR Detection Kit è un sistema biomolecolare Multiplex simultaneo standardizzato per l’identificazione e la differenziazione qualitativa degli acidi nucleici di Parvovirus (Canine Parvovirus CPV / Feline Panleukopenia Virus FPV) e di αCoronavirus tipo 1 (Canine Coronavirus CCoV / Feline Coronavirus FCoV). Mediante una reazione avanzata in un unico step (one-step RT-PCR), il sistema combina l’azione di una trascrittasi inversa ad alta fedeltà con una Taq DNA polimerasi Hot-Start per l’amplificazione parallela delle sequenze geniche target conservative. Sviluppato per l’esclusivo uso professionale diagnostico in vitro, il kit rappresenta un rigoroso ausilio diagnostico per discriminare rapidamente i principali agenti patogeni responsabili delle sindromi gastroenteriche acute nei piccoli animali.

Protocollo d’Esecuzione

• Preparazione Campione: Utilizzare i tamponi sterili inclusi nella confezione per raccogliere la matrice biologica (feci fresche o campione da tampone anale). Inserire immediatamente il tampone nel tubo del reagente di conservazione del campione fornito e agitare vigorosamente per favorire il rilascio e la completa omogeneizzazione del materiale raccolto.
• Estrazione Nucleica: Trasferire con cura 200µL del supernuatante stabilizzato nel pozzetto denominato “LB” della cartuccia di estrazione pre-riempita.
• Automazione: Posizionare il puntale magnetico nella prima posizione della cartuccia di estrazione, a sinistra del pozzetto “LB”. Inserire la cartuccia nell’estrattore e avviare il ciclo di estrazione automatica tramite l’interfaccia. La procedura guidata si completa in circa 8 minuti e un segnale acustico avviserà del termine del processo.
• Allestimento PCR: Aspirare esattamente 20µL di acido nucleico purificato dal pozzetto d’eluizione “EB” e addizionarli direttamente nella provetta PCR contenente il reagente liofilizzato. Per allestire la corsa del controllo positivo, ricostituire il pellet liofilizzato di controllo con 100µL di acqua purificata o Elution Buffer e trasferirne 20µL in una provetta di reazione separata.
• Analisi: Solubilizzare completamente l’aggregato liofilizzato picchiettando delicatamente la provetta ed evitando l’introduzione di bolle d’aria. Sincerarsi che il fluido sia depositato sul fondo, quindi alloggiare la provetta nel blocco termico dello strumento PCR per iniziare la sessione di amplificazione.
• Interpretazione dei Risultati: Il campione è considerato Positivo per Parvovirus (CPV/FPV) in presenza di una curva ad “S” con Ct < 36 nel canale FAM. Il campione è considerato Positivo per αCoronavirus type 1 (CCoV/FCoV) in presenza di una curva ad “S” con Ct < 36 nel canale VIC/HEX. Il controllo positivo è validato con valori di Ct < 32 in entrambi i canali.

Tabella delle Performance Tecniche

Il parere tecnico: La configurazione saggiata in Multiplex consente l’identificazione simultanea e differenziale in un singolo pozzetto dei due patogeni chiave delle gastroenteriti infettive, ottimizzando i tempi operativi clinici. Il condizionamento in microsfere liofilizzate pre-dosate conferisce un’ottimale stabilità alle escursioni termiche ambientali, escludendo l’impiego della catena del freddo e innalzando la riproducibilità analitica nei contesti decentralizzati (point-of-care). Si ricorda che i risultati dell’amplificazione molecolare fungono da supporto alla rilevazione e devono essere sempre correlati al quadro clinico ed epidemiologico a cura del Medico Veterinario.

Team Tecnico BIOLAB Diagnostici – divisione Veterinaria

Biolab è distributore esclusivo Italia di Gangzhu Medical (GZ MED)