Taylorella equi genitalis per Equini con controllo interno Real Time PCR Detection Kit

REF: GZE007| SKU: 317362| BRAND: GZ MED

Descrizione Scientifica

Il kit GZ MED Taylorella equi genitalis per Equini con controllo interno Real Time PCR rappresenta un’architettura diagnostica molecolare avanzata progettata per la determinazione qualitativa e il supporto alla rilevazione del DNA di Taylorella equigenitalis, l’agente eziologico responsabile della Metrite Contagiosa Equina (CEM). Questa patologia venerea altamente trasmissibile compromette gravemente l’efficienza riproduttiva degli allevamenti equini. Sfruttando la tecnologia della PCR Real Time accoppiata a sonde fluorogeniche ad alta specificità, il saggio permette di identificare tempestivamente anche i portatori asintomatici, superando le criticità e i lunghi tempi di attesa richiesti dagli esami colturali classici.

Questo test qualitativo per uso professionale è un ausilio diagnostico destinato esclusivamente a Medici Veterinari, Ambulatori Veterinari e Cliniche Veterinarie. L’integrazione di un sistema con controllo interno permette di monitorare simultaneamente l’efficacia delle fasi di campionamento, estrazione e amplificazione PCR, minimizzando il rischio di falsi negativi dovuti a inibitori di reazione. Il kit, strutturato in 8 comodi monotest pronti all’uso, include tutti i consumabili pre-allestiti necessari per eseguire l’estrazione a biglie magnetiche e l’amplificazione genica, ottimizzando il flusso di lavoro e riducendo al minimo il rischio di contaminazione crociata in associazione esclusiva con il sistema PCR VET di Gangzhu Medical.

Protocollo d’Esecuzione

• Preparazione Campione:
  
  • Campioni su tampone (tamponi clitoridei, uretrali, vaginali o della fossa uretrale): Raccogliere accuratamente il materiale biologico tramite il tampone clinico sterile monouso. Inserire il tampone nella provetta contenente la soluzione diluente di conservazione, agitare vigorosamente per facilitare la sospensione dei patogeni, quindi spezzare l’asta nel punto di frattura prima di sigillare il tubo.
  
  • Campioni liquidi (secrezioni o liquidi di lavaggio): Trasferire 200 µL di campione liquido all’interno della provetta contenente il buffer di conservazione per l’omogeneizzazione.
• Estrazione Nucleica Automatizzata: Prelevare le cartucce monouso di estrazione necessarie per la sessione e rimuovere la pellicola protettiva superiore in alluminio. Trasferire esattamente 200 µL della sospensione preparata nel pozzetto di lisi contrassegnato con la sigla “LB” (Lysis Buffer).
• Automazione del Processo: Posizionare il puntale conduttivo monouso (magnetic rod sleeve) nell’alloggiamento dedicato a sinistra del pozzetto “LB”. Inserire la cartuccia nell’estrattore automatizzato PCR VET e avviare il programma premendo il tasto “Run”. Il ciclo robotizzato a sfere magnetiche si conclude autonomamente in circa 8 minuti ed è notificato da un segnale acustico.
• Allestimento della Reazione PCR: Prelevare esattamente 20 µL di acido nucleico purificato ed eluito dal pozzetto finale “EB” utilizzando una micropipetta idonea e puntali sterili con filtro. Trasferire il volume direttamente nella provetta eppendorf contenente la master-mix con reagenti liofilizzati. In caso di impiego del Controllo Positivo, ricostituire il liofilizzato aggiungendo 100 µL di acqua purificata o Elution Buffer sterile e trasferirne 20 µL nel tubo PCR corrispondente.
• Dissoluzione e Ciclo Termico: Ricostituire completamente la master-mix liofilizzata picchiettando delicatamente il fondo della provetta con le dita. Assicurarsi, mediante una breve centrifugazione di 10 secondi o un deciso movimento discendente, che tutto il volume di reazione risieda sul fondo e che non vi siano bolle d’aria residue, potenziali fonti di interferenza fluorimetrica o di artefatti analitici. Inserire le provette nel termociclatore Real Time PCR VET, configurare i canali software e avviare la reazione.
• Interpretazione Risultati: L’analisi si basa sulla presenza di curve di amplificazione ed i relativi valori di Cycle Threshold (Ct):
  
  • Risultato Positivo: Comparsa di una tipica curva di amplificazione a forma di “S” accoppiata a un valore di Ct < 36 nel canale specifico del target.
  
  • Risultato Negativo: Assenza di curva di amplificazione o valore Ct uguale a 0 oppure ≥ 36. Un esito negativo riduce la probabilità di un’infezione attiva da Taylorella equigenitalis ma deve essere sempre valutato dal clinico nel contesto anamnestico complessivo.

Tabella delle Performance

Il parere tecnico: L’introduzione di questo saggio molecolare in tempo reale permette di affrontare la diagnostica della Metrite Contagiosa Equina con tempistiche drasticamente ridotte rispetto alle colture tradizionali. L’adozione di master mix liofilizzate riduce gli errori umani di dosaggio e protegge i componenti critici dal degradamento termico durante il trasporto e la conservazione. L’integrazione completa con la piattaforma PCR VET ottimizza le operazioni di screening riproduttivo e supporta le decisioni cliniche ed epidemiologiche in scuderia. I risultati del test forniscono un supporto alla rilevazione e devono essere sempre valutati dal Medico Veterinario in base al quadro clinico e all’anamnesi.

Team Tecnico BIOLAB Diagnostici – divisione Veterinaria

Biolab è distributore esclusivo Italia di GZ MED